吸光度檢測機(jī)構(gòu)
吸光度是一個描述光在通過物質(zhì)時被吸收程度的物理量。吸光度定義為光線在通過溶液或物質(zhì)前的入射光強(qiáng)度與通過物質(zhì)后的透射光強(qiáng)度之間的比值的對數(shù),通常是以10為底的對數(shù)。用數(shù)學(xué)表達(dá)式表示即為A=lg(I0/I1),其中I0是入射光強(qiáng)度,I1是透射光強(qiáng)度。吸光度的大小受到多種因素的影響,包括溶劑、溶液的濃度、溫度等。吸光度是光譜學(xué)中的一個重要參數(shù),它在分析化學(xué)中被廣泛應(yīng)用,用于測定物質(zhì)的濃度或組成。下面就將關(guān)于吸光度的檢測進(jìn)行詳細(xì)的介紹。
影響吸光度的因素包括溶劑、濃度、溫度等。在多組分體系中,如果各組分的吸光質(zhì)點(diǎn)彼此不發(fā)生作用,那么吸光度便等于各組分吸光度之和,這一規(guī)律稱為吸光度的加和性。此外,根據(jù)比爾定律,吸光度與吸光物質(zhì)的量濃度成正比,可以通過對吸光度與濃度作圖來得到光度分析的校準(zhǔn)曲線。在吸光度測定中,為了抵消吸收池對入射光的吸收、反射以及溶劑、試劑等對入射光的吸收、散射等因素,可以采用雙光束分光光度計(jì),并選光學(xué)性質(zhì)相同、厚度相等的吸收池分別盛待測溶液和參比溶液。
而關(guān)于吸光度的檢測,復(fù)達(dá)提供吸光度、PH值、溶解度、比重、揮發(fā)分、外觀、含水量、均勻性、氧化還原、離子含量、粘度、吸附性能、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、含炭量、電導(dǎo)率、氫離子指數(shù)、蒸發(fā)殘留物、磁性、燃點(diǎn)、絕緣性能等檢測項(xiàng)目。
同時可對化工原料、食品添加劑、醫(yī)藥化學(xué)品、日化原料、涂料原料、塑料助劑、橡膠原料、農(nóng)藥原料、水處理藥劑、染料中間體、香料精油、涂料助劑、油脂化學(xué)品、電子化學(xué)品、高分子材料、紡織化學(xué)品、皮革化學(xué)品、礦物化學(xué)品、金屬表面處理等進(jìn)行吸光度的檢測。
吸光度檢測是一種常用的分析化學(xué)方法,用于測定溶液中特定物質(zhì)的濃度。主要方法包括:
1、比較法
適用于單一組分的測定。首先制備與被測溶液濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測溶液。在相同條件下顯色和定容后,測量各自的吸光度。根據(jù)朗伯-比耳定律,可以計(jì)算出被測溶液的濃度。
2、目視比色法
這是一種較簡單的比色方法。通過肉眼比較被測溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的顏色深淺來確定被測物質(zhì)的含量。常用的工具是不同容量的比色管,通過觀察比較,確定被測溶液的濃度范圍。
3、分光光度計(jì)法
使用分光光度計(jì)測量樣品在特定波長下的吸光度。這種方法適用于多種組分的測定,可以通過繪制校準(zhǔn)曲線來定量分析。
4、紫外-可見分光光度法
在190~800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度,用于物質(zhì)的鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定。通過測定不同波長處的吸光度,可以獲得物質(zhì)的吸收光譜,從而確定其特性。
5、酶標(biāo)儀法
在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中常用,將樣品加入酶標(biāo)板,加入相應(yīng)的試劑或底物后,放入酶標(biāo)儀中測量特定波長下的吸光度。
每種方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍,選擇哪種方法取決于具體的應(yīng)用需求和分析條件。
1、打開儀器。首先打開紫外可見分光光度計(jì)的電源開關(guān)。
2、檢查和準(zhǔn)備。檢查吸收池的成套性,確保沒有損壞。對于樣品處理,一般需要稀釋或調(diào)整到適當(dāng)?shù)臐舛龋员苊庥绊憸y量精度。
3、設(shè)置波長。在紫外可見分光光度計(jì)上選擇合適的工作波長,這通常基于所測定物質(zhì)的特性和吸收峰位置。
4、調(diào)零。使用去離子水潤洗比色皿,然后裝入?yún)⒈热芤海谕干浔饶J较抡{(diào)整儀器至0%和100%。
5、測量。在吸光度模式下,先測量參比溶液,然后測量樣品溶液,并重復(fù)測量以取平均值提高精度。
6、數(shù)據(jù)處理。記錄吸光度數(shù)值,并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線或校正因子計(jì)算樣品中所含物質(zhì)的質(zhì)量濃度。
7、清潔和關(guān)閉。使用完畢后,清潔并干燥比色皿等用品,關(guān)閉儀器電源。
1、GB/T 11081-2005 白油紫外吸光度測定法
2、CNS 8995-1982 化學(xué)試藥(吸光度測定法)
3、SH/T 0406-1992 凡士林紫外吸光度測定法
4、NB/SH/T 0415-2013 石油產(chǎn)品紫外吸光度和吸光系數(shù)測定法
5、SH/T 0662-1998 礦物油的紫外吸光度測定法
6、NS 9462-2006 水質(zhì) 紫外吸光度的測定
7、KS D ISO 1053:2012 鋅合金中銅的分析方法吸光度分光光度法
8、UNE 84124:2014 化妝品原料 通過分光光度法吸光度測定紫外線過濾劑
9、ISO/PRF 7059:2023 工業(yè)用己內(nèi)酰胺 波長290 nm處吸光度的測定
10、KS M 0012-2009 吸光光度法分析通則
11、ISO 7059:2023 工業(yè)用己內(nèi)酰胺 波長290 nm處吸光度的測定
12、GSO ISO 3656:2015 動植物油脂 以特定紫外消光度表示的紫外吸光度的測定
13、DIN EN ISO 3656:2017-08 動植物油脂 以特定紫外線消光度表示的紫外線吸光度的測定
14、GB/T 13255.5-2009 工業(yè)用己內(nèi)酰胺試驗(yàn)方法.第5部分:290nm波長處吸光度的測定
15、ASTM D7772-11 炭黑提取物的標(biāo)準(zhǔn)測試方法 - 環(huán)己烷提取物的吸光度
以上就是關(guān)于吸光度檢測的相關(guān)介紹,吸光度檢測在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和環(huán)保等領(lǐng)域中均有廣泛應(yīng)用。尤其在DNA、RNA等大分子分析中,吸光度測定已經(jīng)成為檢測方法中的重要組成部分。
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