凝膠電泳檢測
DNA分子提取得到以后,需要通過電泳技術來檢測其數量和質量。自從瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠被引入核酸研究以來,按相對分子質量大小分離DNA的凝膠電泳技術,已經發展成為一種分析鑒定DNA分子的重要實驗手段。上海復達檢測技術集團多年技術積累,需要檢測凝膠電泳歡迎聯系咨詢,專業團隊為您服務。
(1)DNA的分子大小
線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中蠕行,因而遷移得越慢。
(2)瓊脂糖濃度
一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數與凝膠濃度成線性關系。凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。分離小于0.5kb的DNA片段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大于10kb的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%,DNA片段大小間于兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0%。
(3)DNA分子的構象
DNA分子處于不同構象時,它在電場中移動距離不僅和分子量有關,還和它本身構象有關。相同分子量的線狀、開環和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中移動速度是不一樣的,超螺旋DNA移動最快,而開環雙鏈DNA移動最慢。如在電泳鑒定質粒純度時發現凝膠上有數條DNA帶難以確定是質粒DNA不同構象引起還是因為含有其他DNA引起時,可從瓊脂糖凝膠上將DNA帶逐個回收,用同一種限制性內切酶分別水解,然后電泳,如在凝膠上出現相同的DNA圖譜,則為同一種DNA。
(4)電源電壓
在低電壓時,線狀DNA片段的遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增加,不同分子量的DNA片段的遷移率將以不同的幅度增長,片段越大,因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大,因此電壓增加,瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kb的DNA片段有效分離所加電壓不得超過5V/cm。
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1、JIS K 3838:1995 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析的通用規則
2、T/SHSYCXH 10-2022 質粒DNA超螺旋構象的檢測 毛細管凝膠電泳法
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4、T/NAIA 0194-2023 單鏈抗體真核表達質粒的測定 瓊脂糖凝膠電泳法
5、SN/T 2910.2-2011 出口輻射食品的鑒別方法.第2部分:單細胞凝膠電泳法
6、NF V03-723:2017 普通軟麥麥醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定品種
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14、ISO 23293:2020 | IDF 247:2020 乳基嬰兒配方粉 通過十二烷基硫酸鈉-毛細管凝膠電泳(SDS-CGE)定量乳清蛋白含量
15、NF V03-715:1981 普通小麥和硬質小麥.用淀粉凝膠電泳測定麥醇溶蛋白分裂的方法進行變種鑒別
16、NF ISO 23293:2020 乳基嬰兒配方奶粉 - 通過十二烷基硫酸鈉毛細管凝膠電泳 (SDS-CGE) 定量乳清蛋白含量
17、BS ISO 23293:2020 以牛奶為基礎的嬰兒配方粉 通過十二烷基硫酸鈉-毛細管凝膠電泳 (SDS-CGE) 定量乳清蛋白含量
18、YY/T 1805.2-2021 組織工程醫療器械產品 膠原蛋白 第2部分:I型膠原蛋白分子量檢測-十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法
1、溝通需求(在線或電話咨詢);
2、寄樣(郵寄樣品支持上門取樣);
3、初檢(根據客戶需求確定具體檢測項目);
4、報價(根據檢測的復雜程度進行報價);
5、簽約(雙方確定--簽訂保密協議);
6、完成實驗(出具檢測報告,售后服務)。
1、為產品提供進出口服務。
2、為相關的研究論文提供數據。
3、控制產品品質,降低產品成本。
4、根據檢測報告的數據,改進產品質量。
5、協助公檢法部門對樣品質量進行檢測或成分化驗。
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