幽門黃曲霉抑菌測(cè)試——復(fù)達(dá)客戶檢測(cè)案例
2022年01月13日,客服中心接到安徽某公司關(guān)于菁海抑菌菜板原料的檢測(cè),接到反饋后,實(shí)驗(yàn)室工程師第一時(shí)間與客戶進(jìn)行詳細(xì)溝通,情況如下:
客戶是一家新材料研發(fā)公司,想要對(duì)自己家的四款菁海抑菌菜板原料的黃曲霉(B1.B2.G1.G2) 幽門螺旋桿菌 (抑菌防霉)進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)找到我們,咨詢具體項(xiàng)目并出具專業(yè)的第三方檢測(cè)報(bào)告。
菁海抑菌菜板原料 1 菁海抑菌菜板原料 2 菁海抑菌菜板原料 3 菁海抑菌菜板原料 4
根據(jù)客戶提供的樣品,確定樣品具體測(cè)試的條件時(shí)間和項(xiàng)目,然后提供相關(guān)的樣品進(jìn)行測(cè)試,出具專業(yè)的第三方檢測(cè)報(bào)告。
溝通客戶寄送樣品,實(shí)驗(yàn)室接收到樣品及說(shuō)明書后開(kāi)始進(jìn)行最終的確認(rèn)測(cè)試??蛻籼峁┑臏y(cè)試要求相對(duì)而言比較嚴(yán)格,收到樣品后我們立刻溝實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)試的協(xié)調(diào),實(shí)驗(yàn)中我們使用了不同菌種、不不同模擬環(huán)境進(jìn)行測(cè)試。從而順利進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試項(xiàng)目:根據(jù)樣品說(shuō)明書確定了測(cè)試項(xiàng)目:有黃曲霉(B1.B2.G1.G2) 幽門螺旋桿菌抑菌防霉效果,部分測(cè)試結(jié)果如下:
測(cè)試結(jié)果
一、菌株:
黃曲霉 AS 3.3950
二、黃曲霉孢子菌懸液的制備:
1.取菌種斜面,加入3~5mL無(wú)菌純水,用無(wú)菌接種環(huán)在試驗(yàn)菌種的表面輕刮。
2.將孢子提取液注入250mL的錐形瓶,瓶?jī)?nèi)裝45mL 無(wú)菌純水和50粒~70粒直徑為5mm的實(shí)心玻璃球。
3.劇烈振蕩錐形瓶,以打碎孢子塊并使孢子從菌絲體中釋放出來(lái)。
4.用裝有6m厚玻璃棉的玻璃斗,將霉菌孢子懸浮液過(guò)濾到錐形瓶中,以去除大的菌絲體碎片和瓊脂塊。
5.將過(guò)濾后的孢子懸浮液離心,棄掉上層液。
6.在剩余物中加入50mL生理鹽水重新懸浮并離心。將獲得的每種霉菌孢子以這種方法離心3次(直到上層液變清)。
7.選適宜稀釋度分別取1ml接種瓊脂平皿,計(jì)算菌液濃度。
三、試驗(yàn)程序
試驗(yàn)方法:《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版 2.1.8.7 振蕩燒瓶試驗(yàn)。
試驗(yàn)過(guò)程:
1.試驗(yàn)樣品和陰性對(duì)照樣品組(HDPE 高密度聚乙烯樹(shù)脂)經(jīng)121℃滅菌15min。
2.將 0.75g樣品放入 250ml 的錐形瓶中,分別加入 70ml PBS 和 5ml 菌懸液,使菌懸液在PBS中的濃度為 1×104cfu/ml~5×104cfu/ml。
3.將錐形瓶固定于振蕩搖床上,在作用溫度為 20℃~25℃的條件下,以 300r/min振搖 2min。取0.5ml混合液加到4.5ml PBS中,10倍稀釋至適宜濃度,分別吸取1ml,置于兩個(gè)平皿,用涼至40~45℃的孟加拉紅(虎紅)瓊脂培養(yǎng)基作傾注,轉(zhuǎn)動(dòng)平皿,使其充分均勻,瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板,置25℃±2℃培養(yǎng)3~5d,做活菌計(jì)數(shù),作為振蕩前菌落數(shù)。
4.將 0.75g 樣品放入上述含有 70 ml PBS和 5ml 菌懸液的錐形瓶中,然后將錐形瓶固定于振蕩搖床上,在作用溫度為 20℃~25℃的條件下,以 300r/min 振搖1h。用PBS作適當(dāng)稀釋。分別吸取振蕩前和振蕩后樣液各 1.0ml,以瓊脂傾注法接種平皿,每個(gè)樣液接種兩個(gè)平皿,進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),作為振蕩后菌落數(shù)。
5.試驗(yàn)同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照樣品組(HDPE 高密度聚乙烯樹(shù)脂)和不加樣品組(空白組)。操作程序均與試驗(yàn)組相同。不加樣品組分別取 5ml 菌懸液和70ml PBS 加入 250ml 錐形瓶中,混勻,分別于振蕩前和振蕩后1h,各取適當(dāng)稀釋度進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。
6.試驗(yàn)重復(fù)3次,按下列公式計(jì)算抑菌率:
式中:X為抑菌率,%;為樣本振蕩前平均菌落數(shù),cfu/ml;為樣本振蕩后平均菌落數(shù),cfu/ml。
結(jié)果
結(jié)論
在本次試驗(yàn)條件下,按照《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版 2.1.8.7 振蕩燒瓶試驗(yàn)判定:
1.本實(shí)驗(yàn)中不加樣品組的菌落數(shù)在1×104cfu/mL~5×104cfu/mL之間,且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10%以內(nèi),試驗(yàn)有效。
2.試驗(yàn)組抑菌率與對(duì)照樣品組抑菌率的差值<26%,產(chǎn)品無(wú)抗菌作用。
一、菌株:幽門螺旋桿菌 BNCC 354364
二、試驗(yàn)程序
試驗(yàn)方法:《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版 2.1.8.7 振蕩燒瓶試驗(yàn)。
試驗(yàn)過(guò)程:
1.試驗(yàn)樣品和陰性對(duì)照樣品組(HDPE 高密度聚乙烯樹(shù)脂)經(jīng)121℃滅菌15min。
2.將 0.75g樣品放入 250ml 的錐形瓶中,分別加入 70ml PBS 和 5ml 菌懸液,使菌懸液在PBS中的濃度為 1×104cfu/ml~5×104cfu/ml。
3.將錐形瓶固定于振蕩搖床上,在作用溫度為 20℃~25℃的條件下,以 300r/min振搖 2min。取0.5ml混合液加到4.5ml PBS中,10倍稀釋至適宜濃度,分別吸取1ml,置于兩個(gè)平皿,用涼至40~45℃的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基作傾注,轉(zhuǎn)動(dòng)平皿,使其充分均勻,瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板,置35℃±2℃ 5%CO2培養(yǎng)3~5d,做活菌計(jì)數(shù),作為振蕩前菌落數(shù)。
4.將 0.75g 樣品放入上述含有 70 ml PBS和 5ml 菌懸液的錐形瓶中,然后將錐形瓶固定于振蕩搖床上,在作用溫度為 20℃~25℃的條件下,以 300r/min 振搖1h。用PBS作適當(dāng)稀釋。分別吸取振蕩前和振蕩后樣液各 1.0ml,以瓊脂傾注法接種平皿,每個(gè)樣液接種兩個(gè)平皿,進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),作為振蕩后菌落數(shù)。
5.試驗(yàn)同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照樣品組(HDPE 高密度聚乙烯樹(shù)脂)和不加樣品組(空白組)。操作程序均與試驗(yàn)組相同。不加樣品組分別取 5ml 菌懸液和70ml PBS 加入 250ml 錐形瓶中,混勻,分別于振蕩前和振蕩后1h,各取適當(dāng)稀釋度進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。
6.試驗(yàn)重復(fù)3次,按下列公式計(jì)算抑菌率:
式中:X為抑菌率,%;為樣本振蕩前平均菌落數(shù),cfu/ml;為樣本振蕩后平均菌落數(shù),cfu/ml。
結(jié)果
結(jié)論
在本次試驗(yàn)條件下,按照《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版 2.1.8.7 振蕩燒瓶試驗(yàn)判定:
1.本實(shí)驗(yàn)中不加樣品組的菌落數(shù)在1×104cfu/mL~5×104cfu/mL之間,且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10%以內(nèi),試驗(yàn)有效。
2.試驗(yàn)組抑菌率與對(duì)照樣品組抑菌率的差值<26%,產(chǎn)品無(wú)抗菌作用。
客戶收到報(bào)告后說(shuō)會(huì)根據(jù)結(jié)果針對(duì)自己的產(chǎn)品進(jìn)行改良,感謝我們?cè)诋a(chǎn)品研發(fā)過(guò)程中給出的建設(shè)性建議,并表示產(chǎn)品改良后會(huì)繼續(xù)找我們合作,并為我們的服務(wù)提出的大大的好評(píng)。
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